AAT Bioquest1312 Buccutite™ Rapid PE Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction*

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美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發及藥物開發的科學家研發、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發光技術。AAT Bioquest的產品幫助quan世界的科學家和生物醫藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產品，快速的豐富各個領域的產品。

AAT Bioquest1312 Buccutite™ Rapid PE Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction*，產品簡介：

產品品牌：AAT Bioquest

產品貨號：1312

產品名稱：Buccuite™快速PE抗體標記試劑盒*用于標記每個反應25 ug抗體的微型優化*

英文名稱：Buccutite™ Rapid PE Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction*

產品規格：2 Labelings

AAT Buccuite™快速PE抗體標記試劑盒

產品說明：

R-藻紅蛋白（PE）是一種橙色熒光蛋白，激發波長為565nm，發射波長為575nm。亞洲空運中心生物探索提供這款Buccutite™快速標記試劑盒，以促進PE偶聯抗體和其他蛋白質，如鏈霉親和素和其他二級試劑。Buccutite™ PE 偶聯試劑盒提供了一種穩健而方便的抗體與 PE 偶聯的方法。該試劑盒包括預活化的PE和反應緩沖液。整個過程只需要兩次簡單的混合，無需進一步純化。偶聯抗體可用于流式細胞術、WB、ELISA 和 IHC 應用。該試劑盒足以進行 2 次標記反應，每次最多 25 ug 抗體。考慮到PE的大尺寸（240kDa），標記反應中使用的抗體量必須始終小于PE的量。任何新抗體試劑的最佳比例必須通過實驗確定，但每 25 ug PE 含有 50 ug IgG 抗體通常可提供最佳結果。我們的試劑盒提供預活化的 PE，以促進 PE 與抗體和其他蛋白質（如鏈霉親和素和其他二級試劑）的偶聯。我們的預活化 PE 可隨時偶聯，與傳統繁瑣的基于 SMCC 的偶聯化學相比，可提供更高的產量。此外，我們的預活化 PE 通過蛋白質中豐富的氨基與蛋白質偶聯，而 SMCC 化學針對必須通過還原抗體再生的硫醇基團。

組件

組分 A：頰鐵礦™ FOL 活化聚乙烯 2瓶

組件 B：頰鐵礦™ MTA 1瓶

組分C：反應緩沖液 1 瓶 （20 μL）

示例協議

一目了然

協議摘要

1. 將 1.25 μL 反應緩沖液（組分 C）加入抗體 （25 μL） 中

2. 加入 2.5 μL 頰鐵礦™ MTA 工作溶液

3. 在室溫下孵育 30 - 60 分鐘

4. 與 50 μL 頰銅礦™ FOL 活化 PE 工作溶液混合

5. 在室溫下孵育60分鐘

重要提示 收到后，將試劑盒儲存在4°C。 如果儲存得當，試劑盒應穩定保存六個月。或者，組分A和B可以儲存在-20°C。 不要冷凍反應緩沖液（組分C）。在打開之前加熱所有組分并短暫離心小瓶，并在開始偶聯之前立即準備所需的溶液。以下SOP是標記山羊抗小鼠IgG抗體的示例。

工作溶液的制備

1.抗體工作溶液

要標記 25 μg 抗體（假設目標抗體濃度為 1 mg/mL），請將 1.25 μL（占總反應體積的 5%）反應緩沖液（組分 C）與 25 μL 目標抗體溶液混合。

注意 如果您有不同的濃度，請相應地調整抗體體積，使~25 μg抗體可用于標記反應。

注意抗體應溶解在1X磷酸鹽緩沖鹽水（PBS），pH 7.2-7.4中;如果將抗體溶解在甘an酸緩沖液中，則必須用1X PBS，pH 7.2-7.4進行透析，或使用Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜，10 kDa（墨鏡#UFC501008來自密理博）去除廣泛用于抗體沉淀的游離胺或銨鹽（如**銨和乙**）。

注意 不純抗體或用牛血清白蛋白 （BSA） 或明膠穩定的抗體不會很好地標記。

注意 如果抗體濃度低于 1 mg/mL，抗體 – 頰鐵礦™ MTA 反應效率會顯著降低。為了獲得最佳標記效率，建議最終抗體濃度范圍為1-10 mg/mL。

2. 頰鈦MTA ™工作解決方案

將 10 μL DMSO（未提供）加入小瓶中的頰鐵礦 ™ MTA（組分 B）。

3. 頰鈦礦 ™ FOL 活化聚乙烯工作液

添加 50 μL ddH₂O放入小瓶中，加入頰鐵礦™ FOL活化PE（組分A）。

實驗方案樣本

運行抗體-頰鐵礦™ MTA反應

1. 將 2.5 μL Buccutite ™ MTA 工作溶液加入抗體工作溶液中，并通過反復移液幾次或渦旋小瓶幾秒鐘將它們充分混合。

2. 將抗體-頰石™ MTA反應混合物在室溫下保持30-60分鐘。

注意 如果需要，抗體-頰鈦礦™ MTA反應混合物可以旋轉或搖動更長的時間。

進行抗體-PE 偶聯

1. 加入 50 μL 含有抗體頰鞘石 MTA 溶液的頰鐵礦™™ FOL 活化 PE 工作溶液，通過重復移液幾次或渦旋小瓶幾秒鐘充分混合。

2. 孵育 1 至 2 小時。

3. 抗體-PE 偶聯物現已準備就緒。

注意 為了立即使用，抗體-PE 偶聯物需要用您選擇的緩沖液稀釋。

注意 對于長期儲存，抗體-PE 偶聯物溶液需要濃縮或冷凍干燥。

抗體-PE偶聯物的儲存

抗體偶聯物應在載體蛋白（例如 0.1% 牛血清白蛋白）和 0.02-0.05% 疊***存在下儲存。Ab-PE偶聯物溶液可在4 °C下保存兩個月，無明顯變化，避光保存。

AAT Buccuite™快速PE抗體標記試劑盒

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